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GS65鍵盤燈光怎么改顏色,求解
1.首先,可以通過按Fn + Ins直接調整燈光。
2. 然后,按Fn + Ins開關可以調節各種照明效果。
3.如果正在玩游戲,則可以通過按Fn + 2鍵來根據相應的游戲調節燈光。
4. Fn + 3鍵是另一個效果。
5.接著,按Fn + 9可以關閉所有燈。
pcr擴增產物分析的方法有免疫印跡嗎
PCR擴增產物的分析方法微孔板夾心雜交法顏色互補分析法PCR-ELISA法PCR-OLA法PCR-打點雜交法微孔板夾心雜交法:該法是通過一固定于微孔板的捕獲探針與PCR產物的某一區域特 異雜交使產物的間接地固定于微孔板上,然后,再用一生物素 等非放射性標記物標記的檢測探針與產物的另一特異性較一次 雜交,漂洗后顯色即可判斷結果。該法需要兩個雜交過程來檢測 一個產物,因此,其特異性較一次雜交的檢測法高。該法已用于HBV 的檢測,其敏感度可達5個HBVDNA分子。此法的敏感性和特異性與 PCR32P探針的Southern雜交法相當。但PCR微孔板夾心雜交法操作簡 便、快速、避免了同位素標記探針的危害,顯色反應類似于臨床常 規應用的ELISA,適于臨床實驗室常規應用。另一種微孔板雜交法不 是采用夾心法,而是直接將特異探針固定微孔板上,然后用生物素 標記的PCR產物雜交。微孔板雜交與膜印跡雜交相比,有如下優點: ①前者易操作;②固相微孔板漂洗時間短,節省了檢測時間,因為 膜雜交過程中,反應劑要浸透膜中,漂洗時,使反應劑全部浸出需 要時間較長;③本底低,微孔板雜交不需Dehatdt液和預雜交以及封 閉過程。另外,微孔板固定的DNA不需再加熱或UV照射。微孔板雜交的基本過程包括L:DNA的固定,探針的雜交和酶聯顯色。DNA的固定在一定鹽濃度條件下,DNA單鏈的一端可固定在微孔板上。不同來源 的微孔板固定DNA時所需鹽濃度不同。因此,必須用一系列的鹽濃度 (0.15mol/L至3.0mol/LNaCl)來固定加熱變性的核酸,然后,用固 定濃度的標記探針雜交。顯色后,判斷合適的固定鹽濃度。固定方 法的選擇必須使DNA最大量的固定,且不影響雜交。用合適濃度的 NaCl或(NH4)2SO4可達到此目的。硫氰酸鈉則無固定作用。鹽濃度合 適時,DNA應為一端固定到微孔板上,而太低或太高濃度的鹽可能使 DNA“平躺”固定在孔內而影響雜交。Mg2+雖有促進DNA固定的作 用,但它可激活Dnase,所以,一般不用。被固定的DNA應大于300bp, 否則影響雜交結果。每孔可固定高達200ng(624bp)的DNA。合適的鹽 濃和固定量一經確定,可按下法固定DNA。
待固定DNA100℃加熱5min變性并立即冷卻。與合適的固定液混合后,加入微孔板的孔內。固定液:10mmol/L磷 酸鈉-10mmol/LEDTA,pH7.0,合適濃度的NaCl(與DNA變性混合后, 終濃度為最適固定濃度)。用膠布封好,浸于37℃水浴2h。用PBS-0.05%Tween20漂洗3次。立即用于雜交,或封閉于塑料袋內保存。雜交可采用標準的雜交系統雜交。夾心雜交時,是將變性的PCR產物與檢 測探針一并加。雜交與漂洗時間均較一般膜雜交短。顯色根據不同酶標檢測分子的不同選擇不同的底物、終止劑和測定波 長。顏色互補分析法(A)顏色互補分析法是利用三原色原理,當不同DNA片段(A和B)同時擴增時,用引 物5’端修飾技術將不同引物用不同顏色熒光素標記(A片段引物標記綠色的熒 光素,B標記紅色的羅丹明)。如果僅有一條片段被擴增,擴增產物激發后,只有 一種顏色(紅色或綠色)。如果兩條不同大小的片段均被擴增,可通過電泳分離,紫 外激發后可觀察到不同顏色的兩條帶。如果兩條被擴增片段大小相同,電泳后可見一 條紅綠互補色-黃色帶。如果不用電泳法分離擴增片段,通過一定手段除未摻入引 物,亦可觀察到擴增產物的顏色。此時,擴增產物無論大小,只要均被擴增,就可見 一條紅綠互補的黃色條帶。該法簡便、易于自動化,可用于檢測基因,缺失、染色體轉位和病原微生物。這種情 況下,只需判斷產物的有無。另外,在檢測多種基因實變、多種病原菌和HLA分型 時,可用復合PCR。此時,不同引物可用不同熒光素標記(如綠色的ROX;藍色的COUM 等)。PCR-ELISA法:(A)本法避免了電泳和雜交的步驟,適于常規ELISA記數儀檢測。因為5’端修飾后仍 可進行常規PCR擴增特異靶序列,因此,可以通過修飾其中一個引物的5’端使其攜帶 便于PCR產物固定的功能基團,而通過另一引物5’端的修飾使產物便于檢測。鏈霉親和素的包被:不同廠家的聚丙乙烯微孔板的包被效果差異并不顯著。親和層析純化的鏈霉親和素(13U/mg,Sigma公司)用PBS-Tween液140mmol/LNaCl, 2.7mmol/LKCl,4.3mmol/LNa2HPO4,1.4mmol/LK2HPO4,0.05%(w/v)Tween20,Ph7.2 配成1μg/ml。向微孔板的每孔內加入100μl,封好,室溫過夜。 用PBS液漂洗。
擴增產物與包被板的結合:PCR產物1μl用50μ1PBS-Tween液稀釋后加入包被孔內。室溫下作用30min。 用PBS-Tween液漂洗6次,去除未摻入的熒光引物。 ELISA:向結合有PCR產物的孔內加入50μlPBS-Tween液稀釋的HRP-抗FITC抗體,室溫下作用 30min。用PBS-Tween漂洗6次。將1mgTMB溶于1ml二甲基亞砜中,用50mmol/L醋酸鈉-檸檬酸液(Ph4.9)稀釋10倍, 向每孔內加入30%(v/v)H2O23μl,再加入80μlTMB液,使反應在室溫下進行2~5min ,再加入80μl2mol/L硫酸終止反應。于ELISA計數儀上450nm測定OD值。另外,引物的修飾除用圖2-3所示的生物素和FITC外,還可用DNA結合蛋白質的結合位 點和生物素修飾,將DNA結合蛋白質(GCN5或TyrR)包被在微孔板內,與PCR產物結合 后,可加入酶標親和素進行ELISA檢測。PCR-ELISA法可用于PCR產物定量分析。需注 意的是,定量分析時,PCR要在對數期內終止,并需設立已知標準對照。PCR-OLA法(A)研究表明、不同個體中同源DNA片段序列間的差異大部分是限定于單個核苷酸的位 置。已弄清的人遺傳病的40個基因結構變異中,絕大部分屬堿基替換,同樣,作為遺 傳連鎖分析標記的大部分序列變異主要是位于基因組的非編碼區的點突變。所以,一 般基因檢測技術的一個重要要求是能很容易地檢出單一核苷酸變異。寡核苷酸連接試 驗(OLA)就是為此目的而設計的。它可以單獨或結合PCR快速確定緊密相關的DNA序 列。OLA是通過設計兩種能與靶序列DNA精確并列雜交的寡核苷酸完成的。寡核酸雜交 后,DNA連接酶可使其正常配對的相鄰堿基共價連接,而錯配的相鄰堿基可通過調節 連接酶和NaCl濃度防止其連接,連接產物可通過凝膠電泳觀察其大小,或通過5’端 修飾技術使一個寡核苷酸5’端帶有一個配基。連接后,通過固相化的親和配基使其 固定,漂洗后,檢測另一寡核苷酸3’端攜帶的適當標記分子。這一過程如重復進行 多個循環,則連接產物會呈線性增加,故稱這循環進行的OLA為連接檢測反應(LDR)。 此反應中若再加入兩種與上述寡核苷酸互補的寡核苷酸互補的寡核苷酸進行循環的連 接反應,則稱之為連接酶鏈反應。兩寡核苷酸在無靶序列的情況下,在非常接近的位 置發生雜交的可能性極小,因此,OLA技術的假陽性極少。另外,連接酶所形成的鍵 是連接產物。該法適于簡單、標準化的基因組樣品處理法,或直接用表面活性劑和蛋 白酶初步處理有核細胞作為檢測樣品。需指出的是,這里是以放射性標記檢測分子為 例的。如圖2-6中的地高辛標記分子可避免放射性同位素的缺點,且敏感性相當,更 易于自動化。
寡核苷酸的設計與標記:用于OLA的寡核苷酸一般為20mer,使被檢變異核苷酸位于 即將連接的兩個寡核苷酸接頭的5’端。即位于圖2-6中第2步左側寡核苷酸的3’端。 左側寡核苷酸是5’標記生物素。右側寡核苷酸5’端需磷酸化才能與左側寡核苷酸的 3’-OH相連接。用PNK酶處理很易使其5’或3’標記可以選擇其它標記物(如熒光素 等)。OLA反應:向一軟質圓底微滴定板內依次加入:3μlPCR擴增DNA產物;1μl剪切的鮭精DNA(10μg /μl);1μl0.5mol/LNaCl混勻室溫作用10min。加入1μl0.5mol/LHCl,混勻。加入1μl生物素標記探針水溶液(140fmol)和1μl32P探針(1.4fmol),2μlT4連 接(約0.1WeiSS單位,用5×連接緩沖液稀釋)。5X連接緩沖液:250mmol/LTris-HCl, Ph7.5;500mmol/LNaCl;500mmol/LMgCl2;25mmol./LDTT;5mmol/LATTP;500μg/μlBSA。 不同寡核苷酸與底物反應的連接所需酶液度不同,OLA試驗時,一定要小心滴定最適 酶濃度,提高連接溫度(50℃)可擴加OLA的特異性。混勻,在100%濕度下于37℃作用1h。加入1μl1mol/LNaOH,混勻,室溫下作用10min。加入1μl1mol/LHCl中和。加入2μl10%SDS,3μl15%(w/v)鏈霉親和素包被的瓊脂糖懸液,混勻后室溫作用 10min。將一事先用0.5%奶粉-0.1%SDS-100μg/ml蛙精DNA煮過的Whatman4號濾膜置于點樣器 上,然后,將微孔板內混合液加入點樣孔內,真空抽濾點膜。再用數毫升1%SDS和 0.1mol/LNaOH分別依次抽洗膜。取下膜,用塑料保鮮包好進行放射自顯影。打點雜交當擴增產物是多條帶時,用點雜交更合適。這種方法的基本過 程是,首先將擴增的DNA固定到尼龍膜或硝酸纖維素濾膜上,再 用放射性或非放射性標記的探針雜交。點雜交還有助于檢測突變 DNA的突變類型,用于人類遺傳病診斷和某些基因的分型。放射性同 位素32P標記的寡核苷酸探針檢測的敏感性、特異性和方法的可靠性 均不容懷疑,對人們認識某些疾病與基因變異的關系起了很大的作 用。但是,由于同位素不穩定和放射性危害,不能常規用于臨床或 法醫檢驗。因而用非放射性物質(生物素、和地高辛等)標記的寡 核苷酸探針分析PCR產物以確定核酸序列變異則是一種簡便而安全的 方法。非放射性標記物質穩定性高、使用方便、安全、檢測速度 快。因此,本節僅敘述非放射性標記探針的點雜交與檢測情況。
膜的制備:點雜交膜的制備有兩種方法,一是將擴增產物直接固定于膜上,每 一個探針制備1張膜。然后,用不同的等位基因特異或某一微生物特 異探針在嚴格條件下雜交來檢測擴增產物的突變類型或鑒定病原 菌;另一種方法是將不同的探針固定到尼龍膜上,然后,用標記的 PCR產物作探針去雜交。這樣,根據雜交點的位置即可判斷產物序列 變異的種類。顯然,前一方法較后一方法繁瑣,費時,費力;而后 一方法僅需一次雜交即可判斷結果。產物的固定:⑴取1張帶正電荷的尼龍膜,按點樣器的 大小裁剪膜,并做好標記。⑵將膜浸入水中濕透至少 1min。⑶變性PCR產物:此步可在圓底微孔板或微量離 心管內操作。每點的變性方法為;5~20μl(50~100ng)PCR 產物與100μl變性液(0.4mol/LNaOH-25mmol/LEDAT) 混勻,室溫作用5min即可。⑷小心將預濕的膜裝在點 樣器上,注意膜與點樣器接觸表面不能有任何氣泡。 因氣泡會使點樣點呈環形或月牙形或樣品間彌散融 合。膜固定后,每孔內加100μl變性混合液,打開真空泵。⑸抽干變性液后,每孔內再加100μlTE緩沖 液,真空抽濾“洗滌”樣品。⑹取下膜,置于厚3mm濾 紙上漬干。重復制備用于其它基因探針的膜時,一定要認真清洗點樣器,以免樣品間的交叉污染。⑺漬干 的膜于80℃真空干烤1h或于254nmUV光源下以60~120mJ/cm2 的強度下照射使DNA固定在膜上。此時,的膜可直接用 于雜交,也可以用濾紙包好存于塑料袋或干燥缸內。探針的固定:因寡核苷酸的探針太短,在膜上固定較 困難,即使固定上,也會影響雜交。這就是需要將寡 核苷酸探針用末端轉移酶加polydT尾后,UV線照射固 定。因為UV可激活胸腺嘧啶,使其與尼龍膜上的氨基共價結合,使探針間接地牢固地固定在尼龍膜上。這 種加尾固定的探針不影響雜交。但這種雜交對固定探針的要求是,在同一條件下與PCR產物的雜交必須是特 異的。通過選擇探針的合適長度,G+C含量或通過改變 探針的固定可達到特異性的要求。這種固定的探針可 用于檢測人類基因的突變,也可用來檢測病原微生 物。
(1)加尾反應是用脫氧核糖核酸末端轉移酶(TDT)催化,它可將dT依次加在寡核苷酸的3’端,在四種脫氧 核苷中,以dT加尾效果最好。通過改變dT濃度和TdT量 可調節加尾長度,在下述反應條件下,加尾長度可達 400個dT。①向一微量離心管中依次加入:寡核苷酸探 針,100~200pmol;10×TdT緩沖液(1mol/L二甲胂酸鉀; 250mmol/LTris-HCl,Ph7.6;10mmol/LCoCl2;2mmol/LDTT) 10μl;dTTP80~110nmol;TdT,60~80U;補水至100μl。 ②混勻后,稍加離心,置37℃水浴60~90min。③加入 100μl10mmol/LEDTA終止反應。加尾長度可通過10%聚 丙烯酰胺凝膠電泳監測。(2)點膜:①加尾探針6pmol,用0.3mol/LNaOH室溫處理5min,然后,用2.5mol/LNH4Oac中和。②加入等體 積6×SSC(1×SSC:0.15mol/LNaCl,0.015mol/L檸檬酸三 鈉pH7.0)。③將6×SSC預濕的尼龍膜(zeta-probe)或 hybond-N固定在點樣器上。④點樣方法同上。(3)固定:①小心取下膜,置于TE緩沖液飽和的4~6 濾紙上,DNA面朝上。②將濾紙和膜一起置于254nmUV 燈下照射固定,poly(dT)400尾的探針在40mJ/cm2r的 劑下固定效果最好。輻射劑與給定光源對給定面積的 能量釋放率(輻照度)和輻照時間有關。一般對一個 固定光源而言,輻照劑量為:輻照劑量(J/cm2)=輻照度(w/m2)×輻照時間(s)其中,J為輻照能量單位;w為輻照通量單位。輻照度 與照射角度有關,與入射角度θ的余弦(cosθ)呈正 相關。③固定后,在100ml6×SSC-0.5%SDS液中于42~55℃ 漂洗30min左右。漂洗后可立即用于雜交,也可以在蒸溜水中浸洗,晾干后室溫保存。
探針的固定量與加尾長度均影響雜交結果。如用poly (dT)400尾的不同固定量的探針與等PCR產物(2.33fmol) 雜交,固定6pmol苷酸雜交時,有29.2%的PCR產物與 1.1%的寡核而固定的探針600fmol雜交時,僅有2.2%的產 物與0.8%。用不同加尾長度的等量產物6pmol固定寡核苷酸與(時,僅0.33%233fmol)雜交結果表明, poly(dT)300探針與產物雜交;而有1.3%的探針poly (dT)400時,則與產物雜交。因此,固定的探針加最好 在400個以dT尾上,固定量也至少6pmol。雜交寡核苷酸探針的雜交:每一寡核苷酸探針均有自己的雜交溫度和漂 洗條件,主要取決于探針的Tm值。Tm值則受探針長度,G+C含量和雜 交液的鹽渡影響。一般要由如下公式:Tm=4(G+C)+2(A+T)來計算Tm 值。在1mol/L鹽濃時,雜交溫度可比預測的寡核苷酸Tm值低5~20℃。 提高雜交溫度和降低鹽濃度可提高雜交的嚴格性。漂洗液一般不含 鹽,漂洗溫度比雜交溫度低5℃。一旦確定了探針的雜交與漂洗條 件,可按下述方法進行雜交。⑴在(2×SSPE3.6mol/LNaCl:; 200mmol/LNaH2PO4;20mmol/LEDTA,Ph7.4)液中預濕點樣膜。⑵置 膜于塑料封口袋中,并加入適量雜交液(SSPE,5×Denhardt液, 0.5%TritonX-100),封口。袋內不要有氣泡。⑶置于水浴加熱搖 動,在雜交溫度下預雜交5min。⑷取出塑料袋,剪開一角。加入非 放射性標記物(如生物素-補骨脂素)標記的探針。每毫升雜交中加 入1pmol探針。封口后搖育20~60min。雜交時間不能太長,否則會 引起探針與膜的不可逆結合。⑸從袋中取出膜,室溫下在漂洗液 (SSPE-0.1%TritonX-100)中洗1~2次。⑹漂洗溫度下預熱的漂洗 液在合適溫度下洗10min。漂洗后的膜可用于顯色檢測。
反向點雜交:反向點雜交即擴增產物作為相中的探針與固定到膜上 的寡核苷酸雜交。如前述,這種雜交最基本的要求就是在同一條件 下,所有固定探針均與擴增產物特異雜較。為此,主要是認真選擇 與設計寡核苷酸探針,使各探針在同一條件下Tm值相近。在同一雜 交特異。一旦確定了合適的雜交和漂洗條件,即可按上述基本程度雜交。只是雜交探針(產物)在加入前應加熱變性或用等體積的 400mmol/LNaOH-10mmol/LEDTA變性。雜交時間(2~4h)要長些。PCR 產物的標記可以用標記引物擴增或在擴增時摻入標記物。雜交的檢測不同非放射性標記物的檢測原則上基本相同。若為酶標探針則可直接進行顯色檢測。下面以生物素標記物為例加以說明。酶標親和素的結合 ⑴漂洗后的膜在緩沖液A(PBS,100mmol/LNaCl,5%TritonX-100) 中與一定濃度的HRP-標記鏈霉親和素在室溫作用10min,并輕輕振 蕩。⑵用緩沖液B(液A,1mol/L尿素,1%硫酸葡聚糖)在室溫下漂 洗5min,并輕輕振蕩,將膜上非特異吸附的HRP-鏈霉親和素洗掉。顯色 不同酶標親和素的顯色條件與底物均不同,下面以HRP的顯色加以說 明。⑴將上述膜于緩沖液C(100mmol/L檸檬酸鈉,pH5.0)中在室溫下作 用5min,并輕輕振蕩。⑵在緩沖液D中室溫下,輕輕振蕩10min。此步應避強光。緩沖液D: 1份底物(TMB:2mg/ml,用無水乙醇配制)和19份緩沖液C。⑶在緩沖液E中顯色,該液應現用現配。應避強光。緩沖液E:2000 份緩沖液D和1份3%H2O2。顯色時間取決于雜交體中含標記物的量; 一般為1~15min即可。雜交陽性呈深藍紫色。⑷當膜色(信/噪比)合適時,在液C中洗膜1h終止反應,在此過程 中應更換2~3次液體。⑸雜交膜可拍照記錄結果,也可封于緩沖液C避光條件下貯存。膜的再利用 ⑴脫色:將膜置于0.18%Na2SO4液中即可脫掉膜上的顏色。 ⑵去雜交的探針:將膜置于水-0.5%SDS中,65℃加熱1h。 ⑶這種處理的膜可再與另一種探針雜交。
問題與對策信號弱:①點膜的產物少-增加點膜量;②雜交時探針濃度低-加大 探針濃度;③雜交漂洗過于嚴格-增加鹽濃度或降低雜交溫度;④TMB 液貯存時間過長(TMB液4℃可存2個月)-重新配制。本底信號強:①雜交時探針濃度高-降低探針濃度;②雜交時間長- 縮短雜交時間;③雜交漂洗不嚴格-降低鹽濃度和提高雜交溫度;④ 顯色時間長-縮短顯色時間。雜交膜的高本底著色:①同②;②在緩沖液C中洗膜時間短-延長漂 洗時間(過多的硫酸葡聚糖也能增加膜的本底著色;③同2④;④避 光不嚴格-顯色過程中及顯色后要確保雜交膜的避光。陰性對照出現陽性信號:①點樣混淆,即把陽性標本點于陰性對照 的位置,重復實驗即可糾正;②PCR較物的殘留污染,用新配的試劑 重復全部擴增反應。(我自己加進的:Hybond—N+:Hybond-N+是帶正電尼龍膜,對在堿性條件下雜交和普通的Southern雜交均有很好的靈敏性,故核酸樣品可通過簡單的堿處理固定在膜上,而不必在紫外燈下固定,盡管紫外固定的重復性最好。)
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PCR擴增產物的分析方法
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PCR擴增產物的分析方法
微孔板夾心雜交法
顏色互補分析法
PCR-ELISA法
PCR-OLA法
PCR-打點雜交法
微孔板夾心雜交法:
該法是通過一固定于微孔板的捕獲探針與PCR產物的某一區域特 異雜交使產物的間接地固定于微孔板上,然后,再用一生物素 等非放射性標記物標記的檢測探針與產物的另一特異性較一次 雜交,漂洗后顯色即可判斷結果。該法需要兩個雜交過程來檢測 一個產物,因此,其特異性較一次雜交的檢測法高。該法已用于HBV 的檢測,其敏感度可達5個HBVDNA分子。此法的敏感性和特異性與 PCR32P探針的
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001E——尼多麗娜
001F——尼多后
0020——尼多郎♂
0021——尼多力諾
0022——尼多王
0023——皮皮
0024——皮可斯
0025——六尾
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0028——胖可丁
0029——超音蝠
002A——大嘴蝠
002B——走路草
002C——臭臭花
002D——霸王花
002E——蘑菇蟲
002F——巨菇蟲
0030——毛球
0031——末入蛾
0032——地鼠
0033——三地鼠
0034——喵喵
0035——貓老大
0036——可達鴨
0037——哥達鴨
0038——猴怪
0039——火爆猴
003A——卡蒂狗
003B——風速狗
003C——蚊香蝌蚪
003D——蚊香蛙
003E——大力蛙
003F——卡斯
0040——勇吉拉
0041——胡地
0042——腕力
0043——豪力
0044——怪力
0045——喇叭花
0046——口呆花
0047——大食花
0048——瑪瑙水母
0049——毒刺水母
004A——小拳石
004B——隆隆石
004C——隆隆巖
004D——小火馬
004E——烈焰馬
004F——呆呆獸
0050——呆河馬
0051——小磁怪
0052——三磁怪
0053——大蔥鴨
0054——多多
0055——多多利
0056——小海獅
0057——白海獅
0058——臭泥
0059——臭臭泥
005A——大舌貝
005B——鐵甲貝
005C——鬼斯
005D——鬼斯通
005E——耿鬼
005F——大巖蛇
0060——食夢獸
0061——催眠獸
0062——大鉗蟹
0063——巨鉗蟹
0064——雷電球
0065——雷霆球
0066——蛋蛋
0067——椰蛋樹
0068——卡拉卡拉
0069——嘎拉嘎拉
006A——沙瓦郎
006B——艾比郎
006C——大舌頭
006D——瓦斯彈
006E——雙彈瓦斯
006F——鐵甲犀牛
0070——鐵甲暴龍
0071——吉利蛋
0072——蔓藤怪
0073——袋龍
0074——墨海馬
0075——海刺龍
0076——角金魚
0077——金魚王
0078——海星
0079——寶石海星
007A——魔偶
007B——飛天螳螂
007C——迷唇姐
007D——電擊獸
007E——鴨嘴火龍
007F——鉗刀甲蟲
0080——肯泰羅
0081——鯉魚王
0082——暴鯉龍
0083——乘龍
0084——百變怪
0085——伊布
0086——水伊布
0087——雷伊布
0088——火伊布
0089——3D龍
008A——菊石獸
008B——多刺菊石獸
008C——萬年蟲
008D——鐮刀蟲
008E——化石翼龍
008F——卡比獸
0090——急凍鳥
0091——閃電鳥
0092——火焰鳥
0093——迷你龍
0094——哈克龍
0095——快龍
0096——超夢
0097——夢幻
0098——菊草葉
0099——月桂葉
009A——大菊花
009B——火球鼠
009C——巖漿鼠
009D——暴焰獸
009E——小鋸鱷
009F——藍鱷
00A0——大力鱷
00A1——尾立
00A2——大尾立
00A3——小貓頭鷹
00A4——貓頭鷹
00A5——金龜蟲
00A6——昆蟲戰士
00A7——獨角蛛
00A8——大角蛛
00A9——叉字蝠
00AA——電燈魚
00AB——大電燈魚
00AC——皮丘
00AD——小皮皮
00AE——小胖丁
00AF——刺頭蛋
00B0——刺頭鳥
00B1——天然雀
00B2——天然鳥
00B3——電綿羊
00B4——電氣羊
00B5——電氣龍
00B6——美麗花
00B7——水鼠
00B8——大水鼠
00B9——偽裝樹
00BA——大水蛙
00BB——毽子草
00BC——毽子花
00BD——毽子棉
00BE——強尾猴
00BF——向日種子
00C0——向日葵花
00C1——花羽蜓
00C2——烏波
00C3——沼王
00C4——光依布
00C5——暗依布
00C6——暗烏鴉
00C7——呆呆獸王
00C8——夢妖
00C9——未知圖騰
00CA——果然翁
00CB——雙頭長頸鹿
00CC——松果獸
00CD——核果獸
00CE——土龍
00CF——蝎子蝠
00D0——鋼巖蛇
00D1——布魯
00D2——布魯皇
00D3——河豚
00D4——鋼甲螳螂
00D5——壺壺龜
00D6——獨角仙
00D7——狃拉
00D8——姬熊
00D9——圈圈熊
00DA——小蝸牛
00DB——熔巖蝸牛
00DC——小豬怪
00DD——長毛豬
00DE——太陽珊瑚
00DF——怪蛙魚
00E0——章魚
00E1——企鵝
00E2——飛魚怪
00E3——鋼鳥
00E4——暗犬
00E5——地獄犬
00E6——海馬龍
00E7——短腳象
00E8——輪子象
00E9——3D龍2
00EA——驚角鹿
00EB——圖圖犬
00EC——巴爾郎
00ED——卡波郎
00EE——迷唇娃
00EF——小電擊獸
00F0——小鴨嘴火龍
00F1——奶牛
00F2——幸福蛋
00F3——雷皇
00F4——炎帝
00F5——水君
00F6——幼甲獸
00F7——蛹甲獸
00F8——巨大甲獸
00F9——路基亞
00FA——鳳凰
00FB——雪拉比
0115——樹蜥蜴
0116——森林蜥蜴
0117——蜥蜴王
0118——小火雞
0119——斗火雞
011A——火雞戰士
011B——小水狗
011C——水狗
011D——水狗王
011E——皮皮犬
011F——黑毛犬
0120——針鼠
0121——大飛鼠
0122——紅毛蟲
0123——小白蛹
0124——黃蝶
0125——小粉蛹
0126——毒蛾
0127——頂葉獸
0128——頂葉童
0129——樂天河童
012A——橡實果
012B——長鼻葉
012C——鐵扇天狗
012D——鉆地蟲
012E——風速蟬
012F——鬼蟬
0130——麻燕
0131——大麻燕
0132——木果獸
0133——木生獸
0134——暈眩熊
0135——海鷗
0136——大嘴鵜鶘
0137——水蛛怪
0138——巨蛛怪
0139——皮皮鯨
013A——鯨魚王
013B——小松鼠
013C——大松鼠
013D——變色龍
013E——土偶
013F——三土偶
0140——磁石怪
0141——熔巖烏龜
0142——地獄超人
0143——泥鰍
0144——龍鰍
0145——心形魚
0146——奇亞蟹
0147——大利蟹
0148——丑丑魚
0149——美麗龍
014A——三色鯊
014B——鯊魚王
014C——大頭怪
014D——小蜻蜓龍
014E——蜻蜓龍
014F——拳擊兔
0150——相撲熊
0151——電氣獸
0152——雷電獸
0153——噴火駝
0154——雙峰噴火駝
0155——海象球
0156——大海象
0157——海象王
0158——仙人球
0159——惡魔仙人掌
015A——小頭冰怪
015B——巨頭冰怪
015C——月亮石
015D——太陽石
015E——小水鼠
015F——彈簧豬
0160——飛天豬
0161——正電兔
0162——負電兔
0163——巨嘴娃
0164——冥思獸
0165——佳雷木
0166——云雀
0167——大云雀
0168——果然寶寶
0169——鉆墻鬼
016A——獨眼鬼
016B——芭蕾玫瑰
016C——小懶猴
016D——狂猴
016E——大猩猩
016F——毒布丁
0170——毒布丁王
0171——香蕉飛龍
0172——音波兔
0173——噪音怪
0174——噪音王
0175——海貝
0176——大嘴鰻
0177——長睫鰻
0178——災獸
0179——小失眠鬼
017A——失眠鬼
017B——鋼尾蛇
017C——斬貓
017D——化石魚
017E——鋼甲蟲
017F——鋼甲犀牛
0180——鋼甲暴龍
0181——天氣怪
0182——母螢火蟲
0183——公螢火蟲
0184——化石花
0185——化石巨花
0186——化石蝎
0187——化石巨蝎
0188——感知獸
0189——神知獸
018A——圣護獸
018B——寶貝龍
018C——甲殼龍
018D——血翼飛龍
018E——鐵啞鈴
018F——金屬怪
0190——鋼螃蟹
0191——巖神柱
0192——冰神柱
0193——鋼神柱
0194——海皇牙
0195——古拉頓
0196——烈空龍
0197——紅水都
0198——藍水都
0199——許愿星
019A——迪奧西斯
019B——風鈴子
性格代碼
綠寶石中、日文:
開啟:0D64F50E914CFF54——注意:一旦開啟,如不對性格和性別進行定義,則默認性別為雌性,默認性格為實干型
解除:A41703C1D8C05F84
綠寶石英文:
開啟:8C3951ED96C78B6A——和上面一個道理,注意就是了
解除:9521ED6DFF233B04
以下中、日、英通用
性別:雄——03007EC8:FA,雌——03007EC8:00
性格:03007ECA:xxxx
性格代碼列表:(由于翻譯原因,性格的命名可能有出入)
實干——0000
孤僻——0010
勇敢——0020
固執——0030
調皮——0040
大膽——0050
坦率——0060
悠閑——0070
淘氣——0080
無慮——0090
膽小——00A0
急噪——00B0
認真——00C0
開朗——00D0
天真——00E0
保守——00F0
穩重——0100
冷靜——0110
害羞——0120
馬虎——0130
沉著——0140
溫順——0150
狂妄——0160
慎重——0170
浮躁——0180
____________________________________________________________________________________________
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1道具金手指
只能通過修改在商店里購買的物品來獲得道具,修改方法如下:
在道吉鎮的商店買物品,選好購買數量后,等服務員問你是否要買下道具時,不要急著按A,先輸入下面這條金手指:
03005B72:XX
XX是物品的代碼(見下表),輸入后買下道具,之后刪除金手指就可以了。
道具列表
球
0001 大師球
0002 超力怪獸球
0003 超級球(比怪獸球更厲害些)
0004 怪獸球(普通的球)
0005 砂狐球(砂狐樂園專用球)
0006 觸網球(容易抓水和蟲類的怪獸)
0007 大布斯球(容易抓海底的怪獸)
0008 尼斯道球(怪獸越弱越容易抓)
0009 利比道球(容易抓抓過的球)
000a 達伊瑪球(回合數越長越容易抓)
000b 高基石球(抓到的怪獸變親密)
000c 布雷密球(珍惜怪獸球)
道具
000d 傷藥(體力恢復20)
000e 解毒藥(恢復毒狀態)
000f 燒傷恢復(恢復燒傷狀態)
0010 解凍藥(恢復凍狀態)
0011 清醒藥(恢復沉睡狀態)
0012 麻痹恢復(恢復麻痹狀態)
0013 恢復藥(全恢復體力與所有狀態)
0014 慢談藥(體力全恢復)
0015 傷藥(體力恢復200)
0016 好傷藥(體力恢復50)
0017 萬能恢復(全部恢復)
0018 精神片(死亡恢復體力一半)
0019 精神草(死亡全恢復體力)
001a 美味水(恢復體力50)
001b 精神汽水(恢復體力60)
001c 米力液(恢復體力80)
001d 木木奶(恢復體力100)
001e 力量粉(恢復體力50,很苦粉,減底怪獸親密度)
001f 力量根(恢復體力200,很苦根,減底怪獸親密度)
0020 萬能粉(全恢復狀態,非常苦的粉,大大減低與怪獸的親密度)
0021 復活草(死亡復活,很苦的草)
0022 pp艾依(1種技能值恢復10)
0023 pp力卡(1種技能值全恢復)
0024 ????????(?????)
0025 pp最大(1只怪獸的全部技能值全恢復)
0026 飛音餅(恢復全部異常狀態)
0027 藍玻璃(恢復沉睡狀態,可用無限次)
0028 黃玻璃(恢復混亂狀態,可用無限次)
0029 紅玻璃(恢復頹廢狀態,可用無限次)
002a 黑玻璃(不遇野生怪獸)
002b 白玻璃(容易遇野生怪獸)
002c 樹果汁(恢復體力20)
002d 圣是(死亡恢復全部體力,異常狀態恢復)
002e 淺水鹽(看看洞用的道具)
002f 淺水貝(看看洞用的道具)
0030 紅碎片(換進化石的道具)
0031 藍碎片(換進化石的道具)
0032 黃碎片(換進化石的道具)
0033 綠碎片(換進化石的道具)
0034—03e ????????(?????)
003f 最大上升(體力基礎值提高)
0040 贊美語(攻擊基礎值提高)
0041 落海夫(防御基礎值提高)
0042 因得西(敏捷基礎值提高)
0043 立麥森(特攻基礎值提高)
0044 奇異甜食(怪獸升1級)
0045 值上升(技能值的最大值上升)
0046 極道山果(德望基礎值提高)
0047 值最大(技能值提高到最大)
0048 ?????????(?????)
0049 效果卡(戰斗中…能避開對方的攻擊,用于裝備)
004a 清洗物(戰斗中…容易命中要害,用于裝備)
004b 布拉斯力量(戰斗中…攻擊力上升,用于裝備)
004c 力道(戰斗中…防御力上升,用于裝備)
004d 敏捷力(戰斗中…敏捷上升,用于裝備)
004e 紀念打(戰斗中…技能容易命中)
004f 特別上升(戰斗中…特攻的威力上升,用于裝備)
0050 皮皮木偶(在戰斗中逃脫)
0051 小松鼠尾(在戰斗中逃脫)
0052—05c ????????(?????)
005d 太陽石(讓獨特的怪獸進化)
005e 月亮石(讓獨特的怪獸進化)
005f 火焰石(讓獨特的怪獸進化)
0060 雷電石(讓獨特的怪獸進化)
0061 水石(讓獨特的怪獸進化)
0062 珊瑚石(讓獨特的怪獸進化)
0063—066 ????????(?????)
0067 小的樹果(普通的樹果容易成熟)
0068 大的樹果(珍貴的樹果難成熟)
0069 ????????(?????)
作者: 54385p4 2004-10-6 16:17 回復此發言
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2 綠寶石金手指 絕對有效
006a 珍珠(美麗的珍珠容易成熟)
006b 大珍珠(很美麗的大珍珠難成熟)
006c 星沙(美麗的紅色的沙子)
006d 星星碎片(美麗的紅寶石碎片)
006e 金珠(金星)
006f 心靈碎片(可以恢復忘卻的技能)
0070—078 ????????(?????)
0079 彩色郵件(針鼠模樣的信件)
007a 哈伯郵件(海鷗模樣的信件)
007b 閃光郵件(皮卡丘模樣的信件)
007c 機械郵件(小磁怪模樣的信件)
007d 鳥煙郵件(食葉獸模樣的信件)
007e 十字郵件(皮皮鯨模樣的信件)
007f 珍貴郵件(有持有怪獸模樣的信件)
0080 陰影郵件(鉆墻怪模樣的信件)
0081 熱帶郵件(美麗花模樣的信件)
0082 花邊郵件(有持有怪獸模樣的信件)
0083 神奇郵件(豪華的信件)
0084 懷舊郵件(3只怪獸的信件)
戰斗用道具
00b3 光粉(降低對手命中率)
00b4 白色海石花(下降能力復原)
00b5 競爭背心(攜帶后戰斗只速度變為原來的1/2,戰斗結束后得到的努力值翻倍)
00b6 學習裝置(持有的怪獸得到經驗值)
00b7 老師指甲(偶爾能先發出攻擊)
00b8 安閑玲(持有的怪獸變親密)
00b9 精神海石花(持有的怪獸恢復頹廢狀態)
00ba 守日器(攻擊的威力提高)
00bb 王者之證(有時能讓對手沉睡)
00bc 銀粉(蟲類技能的威力上升)
00bd 守衛飯(持有的怪獸參戰能得到2倍金錢)
00be 清符(難以與野生怪獸)
00bf 心珠(特攻和德望上升,限于雄奇怪和木皮怪)
00c0 進化牙(特攻上升パ—ルル柏魯蚌攜帶后特攻提升至2倍,攜帶后通訊進化道具)
00c1 進化鱗片(德望上升パ—ルル柏魯蚌攜帶后特防提升至2倍,攜帶后通訊進化道具)
00c2 煙珠(遇到野生的怪獸能逃脫)
00c3 不變石(持有的怪獸不會進化)
00c4 精神器(偶爾能防御)
00c5 幸福怪獸蛋(怪獸經驗值更容易上升)
00c6 焦點鏡(容易命中要害)
00c7 杯衣(鋼類技能威力上升)
00c8 余物(體力能在戰斗間慢慢恢復)
00c9 龍鱗(飛龍類怪獸持有的奇異鱗片)
00ca 電珠(特攻上升,限于皮卡丘)
00cb 軟沙(地面類技能的威力上升)
00cc 堅硬石頭(巖石類技能的威力上升)
00cd 奇跡種(草類技能的威力上升)
00ce 黑色眼鏡(惡類技能的威力上升)
00cf 黑帶(格斗類技能的威力上升)
00d0 磁鐵(電類技能的威力上升)
00d1 神秘水珠(水類技能的威力上升)
00d2 尖嘴(飛行類技能的威力上升)
00d3 毒針(毒類技能的威力上升)
00d4 不化冰(冰凍技能的威力上升)
00d5 詛咒符(幽靈類技能的威力上升)
00d6 銀勺(超能技能的威力上升)
00d7 木炭(火焰類技能的威力上升)
00d8 龍牙(飛龍類技能的威力上升)
00d9 西庫頭巾(正常類技能的威力上升)
00da 上升葉片(奇異箱子,收集用)
00db 空貝(對敵人損傷時體力會恢復)
00dc 潮物(水屬性攻擊技能威力提升1.05倍,水屬性攻擊技能對自身傷害也會被除以1.05;マリル(水鼠)、マリルリ(大水鼠)攜帶后生蛋得ルリリ(水鼠寶寶)
00dd 氣物(對方技能命中率下降至0.95倍,ソーナンス(果然翁)攜帶后生蛋得ソーナノ(快樂獸)
00de 吉利蛋鉗(容易命中要害,限于吉利蛋)
00df 木物(防御力上升,限于百變怪)
全部招式機機器
招式機器01:0121
招式機器02:0122
招式機器03:0123
招式機器04:0124
招式機器05:0125
招式機器06:0126
招式機器07:0127
招式機器08:0128
招式機器09:0129
招式機器10:012A
招式機器11:012B
招式機器12:012C
招式機器13:012D
招式機器14:012E
招式機器15:012F
招式機器16:0130
招式機器17:0131
招式機器18:0132
招式機器19:0133
招式機器20:0134
招式機器21:0135
招式機器22:0136
招式機器23:0137
招式機器24:0138
招式機器25:0139
招式機器26:013A
招式機器27:013B
招式機器28:013C
招式機器29:013D
作者: 54385p4 2004-10-6 16:17 回復此發言
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3 綠寶石金手指 絕對有效
招式機器30:013E
招式機器31:013F
招式機器32:0140
招式機器33:0141
招式機器34:0142
招式機器35:0143
招式機器36:0144
招式機器37:0145
招式機器38:0146
招式機器39:0147
招式機器40:0148
招式機器41:0149
招式機器42:014A
招式機器43:014B
招式機器44:014C
招式機器45:014D
招式機器46:014E
招式機器47:014F
招式機器48:0150
招式機器49:0151
招式機器50:0152
0153 秘傳機01
0154 秘傳機02
0155 秘傳機03
0156 秘傳機04
0157 秘傳機05
0158 秘傳機06
0159 秘傳機07
015A 秘傳機08
0085 樹果01
0086 樹果02
0087 樹果03
0088 樹果04
0089 樹果05
008A 樹果06
008B 樹果07
008C 樹果08
008D 樹果09
008E 樹果10
008F 樹果11
0090 樹果12
0091 樹果13
0092 樹果14
0093 樹果15
0094 樹果16
0095 樹果17
0096 樹果18
0097 樹果19
0098 樹果20
0099 樹果21
009A 樹果22
009B 樹果23
009C 樹果24
009D 樹果25
009E 樹果26
009F 樹果27
00A0 樹果28
00A1 樹果29
00A2 樹果30
00A3 樹果31
00A4 樹果32
00A5 樹果33
00A6 樹果34
00A7 樹果35
00A8 樹果36
00A9 樹果37
00AA 樹果38
00AB 樹果39
00AC 樹果40
00AD 樹果41
00AE 樹果42
00AF 樹果43
00FE 紅手巾
00FF 籃手巾
0100 粉手巾
0101 綠手巾
0102 黃手巾
0103 風馬自行車
0104 硬幣盒子
0105 探寶器
0106 普通釣竿
0107 好釣竿
0108 超級釣竿
0109 船票
010A 比賽通行證
010C 皮皮鯨噴壺
010D 天力行李
010E 背包
010F 地下鑰匙
0110 沙道自行車
0111 怪獸盒
0112 代后的信
0113 夢幻票
0114 紅色玉石
9115 藍色玉石
0116 探知器
0117 沙道眼睛
0118 隕石
0119 1室鑰匙
011A 2室鑰匙
011B 4室鑰匙
011C 6室鑰匙
011D 倉庫鑰匙
011E 木根化石
011F 指甲化石
0120 デボァスコ-ド
015D 郵包
015E 怪獸笛子
015F 火焰道館鑰匙
0160 自行車兌換卷
0161 假牙
0162 琥珀
0163 黃金室大樓鑰匙
0164 火箭隊鑰匙
0165 菊石獸化石
0166 化石盔化石
0167 照妖眼鏡
0168 自行車
0169 城市地圖
016A 聲音探測器?
016B 電話機?
016C 技能盒子
016D 樹果袋子
016E 電視機
016F 1、2、3島道船票
0170 彩虹船票?
0171 茶
0172 紫色的票?
0173 水底的票?
0174 收集瓶?(深藍市老頭家得到換東西的)
0175 紅寶石
0176 藍寶石
0177 新加入的物品
0178 新加入的物品
2、對戰用的金手指
首位PM的能力值達到上限:
HP:020241E6:03E7
HP上限:020241E8:03E7
攻擊:020241EA:03e7
防御:020241EC:03e7
敏捷:020241F2:03e7
特攻:020241EE:03e7
特防:020241F0:03e7
首位PM的等級:
020241E4:XX
XX為等級,16進制
對方PM能力達到上限:
HP:0202443E:03E7
HP上限:02024440:03E7
攻擊:02024442:03e7
防御:02024444:03e7
特攻:02024446:03e7
特防:02024448:03e7
敏捷:0202444A:03e7
等級:0202443C:XX(XX為等級,16進制)
首位精靈PP全滿 02023D4C:63636363
第1位技能 02023D34:xxxx
第2位技能 02023D36:xxxx
第3位技能 02023D38:xxxx
第4位技能 02023D3A:xxxx
xxxx代碼表:(來自任天堂世界)
0001 拍打(はたく) 40 100% 35 無特效
0002 空手切(からてチョップ) 50 100% 25 容易命中要害
0003 往復拍打(おうふくビンタ) 15 85% 10 2至5次連續攻擊
0004 連續拳(れんぞくパンチ) 18 85% 15 2至5次連續攻擊
0005 百萬噸級鐵拳(メガトンパンチ) 80 85% 20 無特效
0006 招財貓(ネコにこばん) 40 100% 20 戰斗結束后得到金錢,金錢數=使用妖怪等級×使用次數×2
0007 火炎拳(ほのおのパンチ) 75 100% 15 10%機率敵燒傷
0008 冷凍拳 (れいとうパンチ) 75 100% 15 10%機率敵冰凍
作者: 54385p4 2004-10-6 16:17 回復此發言
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4 綠寶石金手指 絕對有效
0009 閃電拳(かみなりパンチ) 75 100% 15 10%機率敵麻痹
000A 抓(ひっかく) 40 100% 35 無特效
000B 夾(はさむ) 55 100% 30 無特效
000C 剪刀斷頭臺(ハサミギロチン) — 30% 5 一擊必殺技,敵人級別高于自己時無效
000D 鐮鼬(かまいたち) 80 100% 10 先蓄一回合再攻擊,容易命中要害,二體攻擊
000E 劍之舞(つるぎのまい) — —— 30 自己攻擊升二級
000F 居合切(いあいぎり) 50 95% 30 在地圖上使用能砍樹`割草,密傳01號機器
0010 起風(かぜおこし) 40 100% 35 能打中飛天的敵人且威力倍增
0011 翅膀拍擊(つばさでうつ) 60 100% 35 無特效
0012 吹飛(ふきとばし) — 100% 20 野外戰斗強制結束,對教練戰斗中強迫敵交換妖怪,優先度-5
0013 飛空(そらをとぶ) 70 95% 15 首回合飛上高空,次回合攻擊,在地圖上使用能飛到去過的城鎮,密傳02號機器
0014 勒住(しめつける) 15 75% 20 使用后2至5回合敵不能交換妖怪,每回合結束時敵HP損失最大值的1/16
0015 打倒(たたきつける) 80 75% 20 無特效
0016 蔓藤鞭(つるのムチ) 35 100% 10 無特效
0017 踐踏(ふみつけ) 65 100% 20 30%機率敵害怕,打中變小的敵人時威力倍增
0018 二段踢(にどげり) 30 100% 30 2次連續攻擊
0019 百萬噸級強踢(メガトンキック) 120 75% 5 無特效
001A 飛踢(とびげり) 70 95% 25 Miss時本應給予對方傷害的1/8會反彈給自己
001B 回旋踢(まわしげり) 60 85% 15 30%機率敵害怕
001C 扔沙(すなかけ) — 100% 30 敵命中率降一級
001D 頭突(ずつき) 70 100% 15 30%機率敵害怕
001E 角突(つのでつく) 65 100% 25 無特效
001F 亂突(みだれづき) 15 85% 20 2至5次連續攻擊
0020 尖角鉆(つのドリル) — 30% 5 一擊必殺技,敵人級別高于自己時無效
0021 撞擊(たいあたり) 35 95% 35 無特效
0022 壓制(のしかかり) 85 100% 15 30%機率敵麻痹
0023 卷緊(まきつく) 15 85% 20 使用后2至5回合敵不能交換妖怪,每回合結束時敵HP損失最大值的1/16
0024 突進(とっしん) 90 85% 20 敵所受傷害的1/4會反彈給自己
0025 暴走(あばれる) 90 100% 20 不受控制地攻擊2至3回合,之后自己混亂
0026 舍身一擊(すてみタックル) 120 100% 15 敵所受傷害的1/3會反彈給自己
0027 搖尾巴(しっぽをふる) — 100% 30 敵防御降